Վիրուսային ԴՆԹ/ՌՆԹ արդյունահանման հավաքածու
Կոմպլեկտը (HC1009B) կարող է արագ արդյունահանել բարձր մաքրության վիրուսային նուկլեինաթթուներ (ԴՆԹ/ՌՆԹ) տարբեր հեղուկ նմուշներից, ինչպիսիք են արյան, շիճուկի, պլազմայի և շվաբրի լվացման հեղուկը՝ հնարավորություն տալով զուգահեռ նմուշների բարձր թողունակության մշակմանը:Հավաքածուն օգտագործում է եզակի ներկառուցված սիլիցիումի վրա հիմնված գերպարամագնիսական մագնիսական ուլունքներ:Եզակի բուֆերային համակարգում սպիտակուցների և այլ կեղտերի փոխարեն նուկլեինաթթուները կլանվում են ջրածնային կապերով և էլեկտրաստատիկ կապով:Մագնիսական ուլունքները, որոնք ունեն կլանված նուկլեինաթթուներ, լվանում են՝ մնացած սպիտակուցներն ու աղերը հեռացնելու համար:Աղի ցածր պարունակությամբ բուֆեր օգտագործելիս մագնիսական ուլունքներից ազատվում են նուկլեինաթթուներ, որպեսզի հասնեն նուկլեինաթթուների արագ տարանջատման և մաքրման նպատակին:Գործողության ամբողջ գործընթացը պարզ է, արագ, անվտանգ և արդյունավետ, և ստացված նուկլեինաթթուները կարող են ուղղակիորեն օգտագործվել ներքևում գտնվող փորձերի համար, ինչպիսիք են հակադարձ տրանսկրիպցիան, PCR, qPCR, RT-PCR, RT-qPCR, հաջորդ սերնդի հաջորդականությունը, կենսաչիպի վերլուծությունը, և այլն:
Պահպանման պայմանները
Պահել 15-25℃ ջերմաստիճանում և տեղափոխել սենյակային ջերմաստիճանում։
Դիմումներ
Արյուն, շիճուկ, պլազմա, շվաբրի էլյուենտ, հյուսվածքների համասեռացում և այլն:
Փորձի գործընթաց
1. Նմուշ վերամշակում
1.1 Հեղուկ նմուշների վիրուսների համար, ինչպիսիք են արյունը, շիճուկը և պլազմային.
2.2 Շվաբրի նմուշների համար. Շվաբրի նմուշները տեղադրեք նմուշառման խողովակների մեջ, որոնք պարունակում են կոնսերվացիոն լուծույթ, պտտեք 1 րոպեով և վերցրեք 300 մկլ վերին նյութ՝ արդյունահանման համար:
1.3 Հյուսվածքների միատարր նյութերում, հյուսվածքների ներծծվող լուծույթներում և շրջակա միջավայրի նմուշներում վիրուսների համար. Նմուշները կանգնել 5-10 րոպե և վերցնել 300 մկլ վերին նյութ՝ արդյունահանման համար:
2. Պատրաստում նախապատրաստմիացված ռեագենտ
Հանեք նախապես փաթեթավորված ռեակտիվները հավաքածուից, շրջեք և մի քանի անգամ խառնեք՝ մագնիսական ուլունքները նորից կախելու համար:Մեղմորեն թափահարեք ափսեը, որպեսզի ռեակտիվները և մագնիսական ուլունքները ընկնեն ջրհորի հատակը:Խնդրում ենք հաստատել ափսեի ուղղությունը և զգուշորեն պոկել կնքող ալյումինե փայլաթիթեղը:
Δ Խուսափեք թրթռումից, երբ պոկվում է խցանման թաղանթը, որպեսզի հեղուկը չթափվի:
3. Գործարկումը ավտոմատըատիկ գործիք
3.1 Ավելացրեք 300 մկլ նմուշ 96 խորքային հորերի ափսեի 1-ին կամ 7-րդ սյունակներում գտնվող հորերին (ուշադրություն դարձրեք աշխատանքային հորերի արդյունավետ դիրքին):Նմուշի մուտքային ծավալը համատեղելի է 100-400 μL-ի հետ:
3.2 96 հորատանցք ունեցող խորը հորատանցքը դրեք նուկլեինաթթուների արդյունահանման սարքի մեջ:Ներդրեք մագնիսական ձողերի թևերը և համոզվեք, որ դրանք ամբողջությամբ պատում են մագնիսական ձողերը:
3.3 Ավտոմատ արդյունահանման համար ծրագիրը սահմանեք հետևյալ կերպ.
3.4 Արդյունահանումից հետո 96 խորքային հորի ափսեի 6-րդ կամ 12-րդ սյունակից (ուշադրություն դարձրեք արդյունավետ աշխատանքային հորի դիրքին) մաքրող նյութը տեղափոխեք մաքուր միջուկազերծ ցենտրիֆուգային խողովակ:Եթե այն անմիջապես չօգտագործեք, խնդրում ենք ապրանքը պահել -20℃ ջերմաստիճանում:
Նշումներ
Միայն հետազոտական օգտագործման համար:Չի օգտագործվում ախտորոշիչ ընթացակարգերում:
1. Արդյունահանված արտադրանքը ԴՆԹ/ՌՆԹ է:Հատուկ ուշադրություն պետք է դարձնել վիրահատության ընթացքում ՌՆԹ-ի դեգրադացիան RNase-ով կանխելու համար:Օգտագործվող պարագաներն ու նմուշառիչները պետք է նվիրված լինեն:Բոլոր խողովակները և խողովակների ծայրերը պետք է ստերիլիզացված լինեն և առանց DNase/RNase-ի:Օպերատորները պետք է կրեն առանց փոշի ձեռնոցներ և դիմակներ։
2. Խնդրում ենք օգտագործել հրահանգների ձեռնարկը ուշադիր կարդալուց առաջ և գործել հրահանգների ձեռնարկին խիստ համապատասխան:Նմուշի մշակումը պետք է իրականացվի ծայրահեղ մաքուր նստարանի կամ կենսաբանական անվտանգության պահարանում:
3. Նուկլեինաթթվի արդյունահանման ավտոմատ համակարգը պետք է ախտահանվի ուլտրամանուշակագույն ճառագայթմամբ 30 րոպե օգտագործելուց առաջ և հետո:
4. Էլյուենտում արդյունահանումից հետո կարող են մնալ մագնիսական բշտիկների հետքեր, այնպես որ խուսափեք մագնիսական ուլունքները ներծծելուց:Եթե մագնիսական ուլունքները ասպիրացված են, այն կարելի է հեռացնել մագնիսական տակդիրով:
5. Եթե չկան հատուկ ցուցումներ ռեագենտների տարբեր խմբաքանակների համար, խնդրում ենք չխառնել դրանք և համոզվեք, որ փաթեթներն օգտագործվեն վավերականության ժամկետում:
6. Բոլոր նմուշները և ռեակտիվը պատշաճ կերպով հեռացնել, մանրակրկիտ սրբել և ախտահանել բոլոր աշխատանքային մակերեսները 75% էթանոլով:
