Ռնասե Ա
Ռիբոնուկլեազ A(RNaseA)-ը միաշղթա պոլիպեպտիդ է, որը պարունակում է 4 դիսուլֆիդային կապ մոտ 13,7 կԴա մոլեկուլային զանգվածով:RNase Նա էնդորիբոնուկլեազ է, որը հատուկ քայքայում է միաշղթա ՌՆԹ-ն C և U մնացորդներում:Մասնավորապես, ճեղքումը ճանաչում է նուկլեոտիդի 5'-ռիբոզից առաջացած ֆոսֆոդիստերային կապը և հարակից պիրիմիդին նուկլեոտիդի 3'-ռիբոզի վրա ձևավորված ֆոսֆատային խումբը, այնպես որ 2,3'-ցիկլային ֆոսֆատները հիդրոլիզվում են մինչև համապատասխան3: նուկլեոզիդ ֆոսֆատներ (օրինակ՝ pG-pG-pC-pA-pG-ն ճեղքվում է RNase A-ի կողմից՝ pG-pG-pCp և A-PG առաջացնելու համար):RNase A-ն ամենաակտիվն է միաշղթա ՌՆԹ-ի ճեղքում:Առաջարկվող աշխատանքային կոնցենտրացիան 1-100 μ Գ/մլ է, որը համատեղելի է տարբեր ռեակցիաների համակարգերի հետ:Աղի ցածր կոնցենտրացիան (0-100 մՄ NaCl) կարող է օգտագործվել ՌՆԹ-ԴՆԹ հիբրիդացման արդյունքում ձևավորված միաշղթա ՌՆԹ, երկշղթա ՌՆԹ և ՌՆԹ շղթաները կտրելու համար:
Այնուամենայնիվ, աղի բարձր կոնցենտրացիայի դեպքում (≥0.3 M), RNase A-ն միայն հատուկ ճեղքում է միաշղթա ՌՆԹ:
RNase A-ն առավել հաճախ օգտագործվում է ՌՆԹ-ն հեռացնելու համար պլազմիդային ԴՆԹ-ի կամ գենոմային ԴՆԹ-ի պատրաստման ժամանակ:Անկախ նրանից, թե արդյոք DNase-ն ակտիվ է պատրաստման գործընթացում, թե ոչ, կարող է հեշտությամբ ազդել ռեակցիայի վրա:Ջրային բաղնիքում եռացնելու ավանդական մեթոդը կարող է օգտագործվել DNase-ի ակտիվությունն ապաակտիվացնելու համար:Այս ապրանքը չի պարունակում DNase և պրոթեզերոն, և չի պահանջում ջերմային բուժում օգտագործելուց առաջ:Բացի այդ, այս արտադրանքը կարող է օգտագործվել նաև մոլեկուլային կենսաբանության փորձերում, ինչպիսիք են RNase-ի պաշտպանության վերլուծությունը և ՌՆԹ-ի հաջորդականության վերլուծությունը:
Պահպանման պայմանները
Ապրանքը պետք է պահվի -25℃~-15℃ ջերմաստիճանում 2 տարի:
Տեխնիկական պայմաններ
| Արտաքին տեսք | Փոշի |
| Քանակ | 100 մգ / 1 գ |
| Ապրանքի տեսակը | RNase A |
Հրահանգներ
Սա RNase A պահեստավորման լուծույթի պատրաստման ընդհանուր մեթոդներից մեկն է:Կարելի է նաև պատրաստելայլ մեթոդներով` համաձայն լաբորատոր կամ տեղեկատու գրականության ավանդական մեթոդների (օրինակուղղակիորեն լուծվող 10 մՄ տրիս-HCl, pH 7,5 կամ տրիս-ՆաCl լուծույթում)
1. Օգտագործեք 10 մՄ նատրիումի ացետատ (pH 5.2) 10 մգ/մլ RNase A պահեստային լուծույթ պատրաստելու համար:
2. Տաքացում 100 ℃ 15 րոպե:
3. Սառեցրեք սենյակային ջերմաստիճանում, ավելացրեք 1 M Tris-HCl 1/10 ծավալ (pH 7,4), կարգավորեք դրա pH-ը մինչև 7,4 (համարօրինակ, ավելացնել 500 մլ 10 մգ/մլ RNase պահեստային լուծույթ 1 M Tris-HCl, pH7.4):
4. Ենթափաթեթավորվում է -20℃ սառեցված պահեստավորման համար, որը կարող է կայուն լինել մինչև 2 տարի:
[Ծանոթագրություններ]:
Չեզոք պայմաններում RNaseA լուծույթը եռացնելիս առաջանում է RNase տեղումներ.Եռացրեք այն ավելի ցածր pH-ով, և եթե տեղումներ լինեն, դա կարող է նկատվել, ինչը կարող է առաջանալ սպիտակուցային կեղտերի առկայությամբ։Եթե նստվածք հայտնաբերվում է եռալուց հետո, ապա կեղտերը կարող են հեռացվել բարձր արագությամբ ցենտրիֆուգմամբ (13000 rpm) և այնուհետև ենթափաթեթավորվել սառեցման համար:
Նշումներ
Խնդրում ենք կրել անհրաժեշտ PPE, ինչպիսիք են լաբորատոր վերարկու և ձեռնոցներ՝ ձեր առողջությունն ու անվտանգությունն ապահովելու համար:
