DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Կատուի համարը՝ HC4007B
DNase I-ը էնդոնուկլեազ է, որը կարող է մարսել մեկ կամ երկշղթա ԴՆԹ:Այն կարող է հիդրոլիզացնել ֆոսֆոդիստերային կապերը՝ արտադրելով մոնո- և օլիգոդեօքսինուկլեոտիդներ, որոնք պարունակում են 5'-ֆոսֆատ և 3'-OH խումբ:DNase I-ի աշխատանքային pH-ի օպտիմալ միջակայքը 7-8 է:DNase I-ի ակտիվությունը կախված է Ca-ից2+և կարող է ակտիվանալ երկվալենտ մետաղական իոնների միջոցով, ինչպիսիք են CO-ն2, Մն2+, Zn2+և այլն Մգ2+, DNase I-ը կարող է պատահականորեն կտրել երկշղթա ԴՆԹ-ի ցանկացած տեղ;Մինչդեռ ներկայությամբ Մն2+, DNase I-ը կարող է կտրել ԴՆԹ-ի կրկնակի շղթան նույն տեղում՝ ձևավորելով բութ ծայրեր կամ կպչուն ծայրեր՝ 1-2 նուկլեոտիդներով դուրս ցցված:Այն կարող է օգտագործվել ՌՆԹ-ի տարբեր նմուշների մշակման համար։
Բաղադրիչներ
| Անուն | 1KU | 5 KU |
| Recombinant DNaseI (առանց RNase) | 500 մլ | 5 × 500 մլ |
| DNase I ռեակցիայի բուֆեր (10×) | 1 մլ | 5 × 1 մլ |
Պահպանման պայմանները
Այս ապրանքը պետք է պահվի -25~-15℃ ջերմաստիճանում 2 տարի:Խնդրում ենք խուսափել կրկնվող սառցակալումից:
Հրահանգներ
Կիրառվում է միայն տեղեկանքի համար ՌՆԹ-ի նմուշներից ԴՆԹ-ի հեռացման համար:
1. Խնդրում ենք օգտագործել առանց RNase-ի ցենտրիֆուգային խողովակները և խողովակների ծայրերը հետևյալ ռեակցիայի համակարգը պատրաստելու համար.
| Բաղադրիչներ | Ծավալը (μL) |
| DNase I ռեակցիայի բուֆեր (10×) | 1 |
| Recombinant DNasel (առանց RNase) | 1 |
| ՌՆԹ | X |
| ՌՆազազերծ ddH2O | Մինչև 10 |
2. Ռեակցիայի պայմանները հետևյալն են՝ 37℃, 15-30 րոպե հետո, ավելացնել 2,5 մՄ EDTA լուծույթի վերջնական կոնցենտրացիան և լավ խառնել, ապա 65℃ 10 րոպե:Մշակված ձևանմուշը կարող է օգտագործվել հետագա RT-PCR կամ RT-qPCR փորձերի համար և այլն:
Նշումներ
1. DNase l-ն զգայուն է ֆիզիկական դենատուրացիայի նկատմամբ;Խառնելիս թեթևակի շրջեք փորձանոթը ևլավ թափահարեք, ուժգին մի թափահարեք:
2. Ֆերմենտը պետք է պահվի սառցե տուփի մեջ կամ սառցե լոգանքի վրա, երբ օգտագործվում է, և այն պետք է պահվի -20℃ ջերմաստիճանում օգտագործելուց անմիջապես հետո:
3. Այս ապրանքը նախատեսված է միայն հետազոտական օգտագործման համար:
4. Խնդրում ենք գործել լաբորատոր բաճկոններով և միանգամյա օգտագործման ձեռնոցներով՝ ձեր անվտանգության համար:
