Ultra Nuclease GMP-դասարանի
Կատուի համարը՝ HC2016A
UltraNuclease GMP-աստիճանը արտահայտվում և զտվում է Escherichia coli-ում (E.coli) գենետիկորեն մշակված և GMP միջավայրում պատրաստված:Այն կարող է նվազեցնել բջջի գերնատանի և բջիջների լիզատի մածուցիկությունը գիտական հետազոտություններում, բարձրացնել սպիտակուցի մաքրման արդյունավետությունը և բարելավել սպիտակուցի ֆունկցիոնալ հետազոտությունը:Արտադրանքը կարող է նաև նվազեցնել հյուրընկալող նուկլեինաթթվի մնացորդները մինչև pg աստիճան՝ բարելավելով կիրառական կենսաբանական արտադրանքների արդյունավետությունն ու անվտանգությունը, ներառյալ վիրուսների մաքրումը, պատվաստանյութերի արտադրությունը և սպիտակուցների/պոլիսաքարիդների դեղագործական արտադրությունը:Բացի այդ, արտադրանքը կարող է կիրառվել նաև՝ կանխելու մարդու ծայրամասային արյան միամիջուկային բջիջների (PBMC) կուտակումը բջջային թերապիայի և պատվաստանյութի մշակման ժամանակ:
UltraNuclease-ը տրամադրվում է մանրէազերծված ռեագենտի տեսքով՝ զտված բուֆերի մեջ (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% գլիցերին), անգույն, թափանցիկ հեղուկի տեսքով:Այս արտադրանքը արտադրվում է GMP գործընթացի պահանջներով և տրամադրվում է հեղուկ տեսքով:
Բաղադրիչներ
UltraNuclease GMP-աստիճան (250 U/μL)
Պահպանման պայմանները
Ապրանքը առաքվում է չոր սառույցով և կարող է պահպանվել -25℃~-15°C ջերմաստիճանում երկու տարի:
Եթե ապրանքը բացված է և մեկ շաբաթից ավելի պահվել է 4℃ ջերմաստիճանում, խորհուրդ ենք տալիս զտելարտադրանքը մանրէաբանական աղտոտումը կանխելու համար:
Տեխնիկական պայմաններ
| Արտահայտման հյուրընկալող | Recombinant E. coli UltraNuclease գենով |
| Մոլեկուլային քաշը | 26,5 կԴա |
| էլեկտրական կետ | 6.85 |
| Մաքրություն | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Պահպանման բուֆեր | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% գլիցերին |
|
Միավորի սահմանում | Մեկ ակտիվության միավորի (U) սահմանումը ֆերմենտի քանակությունն է, որն օգտագործվում էփոխեք ΔA260-ի կլանման արժեքը 1.0-ով 30 րոպեում 2.625 մլ-ումռեակցիայի համակարգ 37℃ ջերմաստիճանում 8.0 pH-ով (համարժեք է ամբողջական մարսմանը37 մկգ սաղմոնի սերմի ԴՆԹ-ն վերածվում է օլիգոնուկլեոտիդների): |
Հրահանգներ
1. Նմուշ Հավաքածու
Կպչուն բջիջներ. հեռացրեք միջավայրը, լվացեք բջիջները PBS-ով և հեռացրեք վերին նյութը:
Կախովի բջիջները. հավաքեք բջիջները ցենտրիֆուգմամբ, լվացեք բջիջները PBS-ով, ցենտրիֆուգեք 6000-ում:rpm 10 րոպե, հավաքեք գնդիկը:
Escherichia coli. հավաքեք բակտերիաները ցենտրիֆուգմամբ, մեկ անգամ լվացեք PBS-ով, ցենտրիֆուգեք 8000 ջերմաստիճանում:rpm 5 րոպե, և հավաքեք գնդիկը:
2. Նմուշի բուժում
Հավաքված բջջային կարկուտները մշակեք լիզի բուֆերով՝ զանգվածի (գ) և ծավալի (մլ) 1: (10-20) հարաբերակցությամբ կամ մեխանիկական կամ քիմիական մեթոդներով սառույցի վրա կամ սենյակային ջերմաստիճանում (1 գ բջջային կարկուտը պարունակում է մոտ
109 բջիջ):
3. Ֆերմենտային բուժում
Ռեակցիոն համակարգին ավելացրեք 1-5 մՄ MgCl և կարգավորեք pH-ը մինչև 8-9:
Ավելացրեք UltraNuclease-ն ըստ 250 միավորի հարաբերակցության՝ 1 գ բջջային կարկուտ մարսելու համար, ինկուբացրեք 37℃ ջերմաստիճանում ավելի քան 30 րոպե:Խնդրում ենք դիմել «Առաջարկվող արձագանքման ժամանակ» ձևին՝ ընտրելու համարբուժման տևողությունը.
4. Գերծածկ Հավաքածու
Ցենտրիֆուգեք 30 րոպե 12000 պտտ/րոպե արագությամբ և հավաքեք վերին նյութը:
Նշում. Եթե լուծույթը թթվային է կամ ալկալային, կամ պարունակում է աղի, լվացող միջոցների կամdenaturants, խնդրում ենք բարձրացնել ֆերմենտի դեղաչափը կամ համապատասխանաբար երկարացնել բուժման ժամանակը:
Առաջարկվող ռեակցիայի պայմաններըons
| Պարամետր | Օպտիմալ վիճակ | Արդյունավետ պայման |
| Mg² + համակենտրոնացում | 1-5 մմ | 1-10 մմ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Ջերմաստիճանը | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT համակենտրոնացում | 0-100 մմ | > 0 մմ |
| Մերկապտոէթանոլի կոնցենտրացիան | 0-100 մմ | > 0 մմ |
| Միավալենտ կատիոնների համակենտրոնացում | 0-20 մմ | 0-150 մմ |
| Ֆոսֆատ lon Concentration | 0-10 մմ | 0-100 մմ |
Խորհուրդ է տրվում Արձագանք Ժամանակը (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease քանակություն (վերջնական կոնցենտրացիա) | Արձագանքման ժամանակը |
| 0.25 U/mL | > 10 ժ |
| 2.5 U/mL | > 4 ժ |
| 25 U/mL | 30 րոպե |
Նշումներ:
Խնդրում ենք կրել անհրաժեշտ PPE, նման լաբորատոր վերարկու և ձեռնոցներ՝ ձեր առողջությունն ու անվտանգությունն ապահովելու համար:
