Robustart Taq ԴՆԹ պոլիմերազա

Robustart Taq DNA Polymerase-ը տաք մեկնարկային ԴՆԹ պոլիմերազ է:Այս արտադրանքը ոչ միայն կարող է ավելի լավ զսպել ոչ սպեցիֆիկ ռեակցիան, որն առաջանում է պրայմերների ոչ սպեցիֆիկ եռացման կամ այբբենարանի ագրեգացիայի հետևանքով PCR համակարգի պատրաստման և ուժեղացման գործընթացում:Հետևաբար, այն ունի գերազանց յուրահատկություն և ավելի արդյունավետ է ցածր կոնցենտրացիայի կաղապարների ուժեղացման համար, և այն հարմար է մուլտիպլեքսացված PCR ուժեղացման ռեակցիայի համար:Ավելին, այս արտադրանքը շատ լավ կիրառելիություն ունի, և կայուն ուժեղացման արդյունքներ կարելի է ստանալ տարբեր տեսակի PCR ռեակցիաների ժամանակ:

Բաղադրիչներ

1.5 U/μL Robustart Taq ԴՆԹ պոլիմերազ

2.10 × PCR բուֆեր II (Mg²+ անվճար) (ըստ ցանկության)

3.25 մՄ MgCl₂(ըստ ցանկության)

* 10 × PCR բուֆեր II (Mg²+ անվճար) չի պարունակում dNTP և Mg²+, խնդրում ենք ավելացնել dNTPs և MgCl₂ռեակցիայի համակարգը պատրաստելիս.

Առաջարկվող հավելվածներ

1.Արագ ուժեղացում:

2.Բազմակի ուժեղացում:

3.Արյան, շվաբրերի և այլ նմուշների ուղղակի ուժեղացում:

4.Շնչառական հիվանդությունների հայտնաբերում.

Պահպանման պայման

-20°C երկարատև պահպանման համար, օգտագործելուց առաջ պետք է լավ խառնել, խուսափել հաճախակի սառցակալումից:

*Եթե սառնարանից հետո տեղումներ են լինում, ապա դա նորմալ է.Խառնելուց և օգտագործելուց առաջ խորհուրդ է տրվում հավասարակշռել սենյակային ջերմաստիճանին:

Միավորի սահմանում

Մեկ ակտիվ միավորը (U) սահմանվում է որպես ֆերմենտի քանակություն, որը ներառում է 10 նմոլ դեզօքսիռիբոնուկլեոտիդ թթվային անլուծելի նյութի մեջ 74°C ջերմաստիճանում 30 րոպե՝ օգտագործելով ակտիվացված սաղմոնի սերմի ԴՆԹ-ն որպես ձևանմուշ/պրայմեր:

Որակի հսկողություն

1.SDS-PAGE էլեկտրոֆորետիկ մաքրությունը ավելի քան 98%:

2.Ուժեղացման զգայունություն, խմբաքանակի հսկողություն, կայունություն:

3.Չկա էկզոգեն նուկլեազային ակտիվություն, չկա էկզոգեն էնդոնուկլեազ կամ էկզոնուկլեազային աղտոտում

Հրահանգներ

Ռեակցիայի կարգավորում

Նշումներ:

1) ա.Բուֆերը չի պարունակում dNTP և Mg²+, խնդրում ենք ավելացնել dNTPs և MgCl₂ռեակցիայի համակարգը պատրաստելիս.

2) բ.Եթե ​​օգտագործվում է qPCR/qRT-PCR-ի համար, ապա ռեակցիայի համակարգին պետք է ավելացվեն լյումինեսցենտային զոնդեր:Սովորաբար, 0,2 մկմ պրիմերի վերջնական կոնցենտրացիան լավ արդյունքներ կտա;եթե ռեակցիայի արդյունավետությունը վատ է, ապա այբբենարանի կոնցենտրացիան կարող է ճշգրտվել 0,2-1 մկմ միջակայքում:Զոնդի կոնցենտրացիան սովորաբար օպտիմիզացված է 0,1-0,3 մկմ միջակայքում:Համակենտրոնացման գրադիենտ փորձեր կարող են իրականացվել՝ գտնելու այբբենարանի և զոնդի լավագույն համադրությունը:

Ջերմային ցիկլի արձանագրություն

Նշումներ

1.Արագ ԴՆԹ պոլիմերազի ուժեղացման արագությունը չպետք է պակաս լինի 1 կբ/10 վրկ-ից:Տարբեր PCR գործիքների ջերմաստիճանի բարձրացման և անկման արագությունը, ջերմաստիճանի վերահսկման ռեժիմը և ջերմահաղորդման արդյունավետությունը շատ տարբեր են, ուստի խորհուրդ է տրվում օպտիմալացնել ռեակցիայի օպտիմալ պայմանները կոնկրետ արագ PCR գործիքի համար:

2.Համակարգը բարձր հարմարվողական է, ավելի բարձր յուրահատկությամբ և զգայունությամբ:

3.Հարմար է օգտագործել որպես բարձր զգայունության PCR հայտնաբերման ռեակտիվներ և կարող են օգտագործվել մուլտիպլեքսային PCR ուժեղացման ռեակցիաներում:

4.5'→3' պոլիմերազային ակտիվություն, 5'→3' էկզոնուկլեազային ակտիվություն;ոչ 3'→5' էկզոնուկլեազային ակտիվություն;չկա սրբագրման գործառույթ:

5.Հարմար է PCR-ի և RT-PCR-ի որակական և քանակական փորձարկման համար:

6.PCR արտադրանքի 3' վերջը A է, որը կարող է ուղղակիորեն կլոնավորվել T վեկտորի մեջ:

7.Եռաքայլ մեթոդը խորհուրդ է տրվում հալման ցածր ջերմաստիճան ունեցող այբբենարանների կամ 200 bp-ից ավելի երկարությամբ բեկորների ուժեղացման համար: