Ռնասե Ա
Ռիբոնուկլեազ A-ն (RNaseA) միաշղթա պոլիպեպտիդ է, որը պարունակում է 4 դիսուլֆիդային կապ՝ մոտ 13,7 կԴա մոլեկուլային զանգվածով։RNase A-ն էնդորիբոնուկլեազ է, որը հատուկ քայքայում է միաշղթա ՌՆԹ-ն C և U մնացորդներում:Մասնավորապես, ճեղքումը ճանաչում է ֆոսֆոդիստերային կապը, որը ձևավորվում է նուկլեոտիդի 5'-ռիբոզի և ֆոսֆատային խմբի կողմից հարակից պիրիմիդին նուկլեոտիդի 3'-ռիբոզի վրա, այնպես որ 2, 3'-ցիկլային ֆոսֆատները հիդրոլիզվում են համապատասխան33: «նուկլեոզիդ ֆոսֆատներ (օրինակ՝ pG-pG-pC-pA-pG-ն ճեղքվում է RNase A-ով՝ pG-pG-pCp և A-PG առաջացնելու համար):RNase A-ն ամենաակտիվն է միաշղթա ՌՆԹ-ի ճեղքում:Առաջարկվող աշխատանքային կոնցենտրացիան 1-100μG/mL է, որը համատեղելի է տարբեր ռեակցիաների համակարգերի հետ:Աղի ցածր կոնցենտրացիան (0-100 մՄ NaCl) կարող է օգտագործվել ՌՆԹ-ԴՆԹ հիբրիդացման արդյունքում ձևավորված միաշղթա ՌՆԹ, երկշղթա ՌՆԹ և ՌՆԹ շղթաները կտրելու համար:Այնուամենայնիվ, աղի բարձր կոնցենտրացիայի դեպքում (≥0,3 Մ) RNase A-ն հատուկ ճեղքում է միայն միաշղթա ՌՆԹ-ն:
RNase A-ն առավել հաճախ օգտագործվում է ՌՆԹ-ն հեռացնելու համար պլազմիդային ԴՆԹ-ի կամ գենոմային ԴՆԹ-ի պատրաստման ժամանակ: Անկախ նրանից, թե DNase-ը պատրաստման գործընթացում ակտիվ է, թե ոչ, կարող է հեշտությամբ ազդել ռեակցիայի վրա:Ջրային բաղնիքում եռացնելու ավանդական մեթոդը կարող է օգտագործվել DNase-ի ակտիվությունն ապաակտիվացնելու համար:Այս ապրանքը չի պարունակում DNase և պրոթեզերոն, և չի պահանջում ջերմային բուժում օգտագործելուց առաջ:Բացի այդ, այս արտադրանքը կարող է օգտագործվել նաև մոլեկուլային կենսաբանության փորձերում, ինչպիսիք են RNase-ի պաշտպանության վերլուծությունը և ՌՆԹ-ի հաջորդականության վերլուծությունը:
Պահպանման պայմանները
Ապրանքը կարող է պահվել -25-15℃ ջերմաստիճանում, ուժի մեջ է 2 տարի:
Հրահանգներ
Սա RNase A պահեստավորման լուծույթի պատրաստման ընդհանուր մեթոդներից մեկն է:Այն կարող է պատրաստվել նաևայլ մեթոդներ՝ համաձայն լաբորատոր կամ տեղեկատու գրականության ավանդական մեթոդների (օրինակուղղակիորեն լուծվող 10 մՄ տրիս-HCl, pH 7,5 կամ տրիս-ՆաCl լուծույթում)
1. Օգտագործեք 10 մՄ նատրիումի ացետատ (pH 5.2) 10 մգ/մլ RNase A պահեստային լուծույթ պատրաստելու համար:
2. Տաքացում 100 ℃ 15 րոպե
3. Սառեցրեք սենյակային ջերմաստիճանում, ավելացրեք 1 M Tris-HCl 1/10 ծավալ (pH 7,4), կարգավորեք դրա pH-ը մինչև 7,4 (համարօրինակ, ավելացնել 500 մլ 10գ/մլ RNase պահպանման լուծույթ 1M Tris-HCL, PH7.4)
4. Ենթափաթեթավորվում է -20℃ սառեցված պահեստավորման համար, որը կարող է կայուն լինել մինչև 2 տարի:
[Ծանոթագրություններ]. Չեզոք պայմաններում RNaseA լուծույթը եռացնելիս առաջանում են RNase տեղումներ.Եռացրեք այն ավելի ցածր pH-ով, և եթե տեղումներ լինեն, դա կարող է նկատվել, ինչը կարող է առաջանալ սպիտակուցային կեղտերի առկայությամբ։Եթե նստվածքը հայտնաբերվում է եռալուց հետո, ապա կեղտը կարող է հեռացվել բարձր արագությամբ ցենտրիֆուգմամբ (13000 rpm), այնուհետև ենթափաթեթավորվել սառեցման համար:
Ապրանքի մասին տեղեկատվություն
| Հոմանիշներ | Ռիբոնուկլեազ I;Ենթաստամոքսային գեղձի ռիբոնուկլեազ;Ռիբոնուկլեազ 3'-պիրիմիդնոոլիգոնուկլեոտիդոհիդրոլազա;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS No. | 9001-99-4 |
| Արտաքին տեսք | Սպիտակ լիոֆիլացված փոշի |
| Մոլեկուլային քաշը | ~ 13,7 կԴա (ամինաթթուների հաջորդականություն) |
| Ph արժեք | 7.6 (ակտիվության միջակայքը 6-10) |
| Հարմար ջերմաստիճան | 60℃ (Ակտիվության միջակայքը 15-70℃) |
| Ակտիվացնող գործակալ | Na2+.Կ+ |
| Արգելակիչ | Rnase արգելակիչ |
| Անակտիվացման մեթոդ | Ջեռուցման միջոցով հնարավոր չէ ապաակտիվացնել, առաջարկվում է օգտագործել ցենտրիֆուգային սյուն |
| Ծագում | խոշոր եղջերավոր անասուն |
| Լուծելիություն | Լուծվող ջրի մեջ (10 մգ/մլ) |
| Կորուստ չորի վրա | ≤5,0% |
| Ֆերմենտային ակտիվություն | ≥60 Կունից միավոր/մգ |
| Իզոէլեկտրական կետ | 9.6 |
Նշումներ
Ձեր անվտանգության և առողջության համար խնդրում ենք կրել լաբորատոր վերարկուներ և միանգամյա օգտագործման ձեռնոցներ շահագործման համար:
