One Step RT-qPCR SYBR Green Premix
Կատուի համարը՝ HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix-ը նախատեսված է ֆլուորեսցենտային քանակականացման համար՝ հիմնված SYBR Green I ներկի վրա:Օգտագործելով գենային հատուկ պրայմերներ, հակադարձ տրանսկրիպցիան և qPCR ռեակցիաները ավարտվում են մեկ խողովակում՝ վերացնելով գլխարկի բացման և խողովակների կրկնակի գործողությունների անհրաժեշտությունը՝ զգալիորեն բարելավելով վերլուծության արդյունավետությունը և նվազեցնելով աղտոտման վտանգը:ՌՆԹ-ի նմուշների համար հավաքածուն օգտագործում է ջերմակայուն հակադարձ տրանսկրիպտազ՝ cDNA-ի արդյունավետ սինթեզի համար և HotStart Taq ԴՆԹ պոլիմերազը՝ քանակական ուժեղացման համար:Օպտիմիզացված բուֆերային համակարգի ներքո հավաքածուի զգայունությունը կարող է լինել մինչև 0,1 pg բարձր արտահայտված թիրախների համար և մինչև 1 pg չափավոր արտահայտված թիրախների համար:Կոմպլեկտը հարմար է ԴՆԹ-ի նմուշների ուժեղացման և քանակականացման համար:Այն թույլ է տալիս նուկլեինաթթուների զգայուն հայտնաբերումը և քանակականացումը տարբեր բույսերի և կենդանիների նմուշներից, բջիջներից և միկրոօրգանիզմներից:
Բաղադրիչներ
| No | Անուն | Ծավալը | Ծավալը |
| 1 | Ընդլայնված բուֆեր | 250 մլ | 2×1,25 մլ |
| 2 | Ընդլայնված ֆերմենտային խառնուրդ | 20 մլ | 200 մլ |
| 3 | RNase Free H2O | 250 մլ | 2×1,25 մլ |
Պահպանման պայմանները
Այս ապրանքը պետք է պահվի -25~-15℃ ջերմաստիճանում լույսից հեռու 1 տարի:
Հրահանգներ
1.Reaction համակարգի կոնֆիգուրացիաd
| Բաղադրիչներ | Ծավալը (μL) | Ծավալը (μL) | Վերջնական կոնցենտրացիան |
| Ընդլայնված բուֆեր | 12.5 | 25 | 1× |
| Ընդլայնված ֆերմենտային խառնուրդ | 1 | 2 | - |
| Forward Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 մկմոլ/լ |
| Reverse Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 մկմոլ/լ |
| ՌՆԹ շաբլոնb | X | X | - |
| RNase Free H2Օc | մինչև 25 | մինչև 50 | - |
Նշումներ:
1) ա.Տայբբենարանի վերջնական կոնցենտրացիան եղել է 0,2 մկմոլ/լ, որը կարող է նաև ճշգրտվել 0,1-ից 1 մկմոլ/լ-ի միջև, ըստ անհրաժեշտության:
2) բ.Ռեագենտը չափազանց զգայուն է, ընդհանուր ՌՆԹ-ով 1pg-1μg միջակայքում, և մարդկային նմուշների փորձարկումը ցույց է տվել 1 pg-100 նգ օպտիմալ ներածում՝ վերահսկելով Ct-ի ընդհանուր արժեքը 15-30 միջակայքում, ըստ անհրաժեշտության:
3) գ.Խորհուրդ է տրվում օգտագործել 20μL կամ 50μL՝ նպատակային գենի ամպլիֆիկացիայի վավերականությունն ու վերարտադրելիությունը ապահովելու համար:
4) դ.Խնդրում ենք պատրաստվել ծայրահեղ մաքուր նստարանին և օգտագործել առանց նուկլեազի մնացորդների ծայրեր և ռեակցիոն խողովակներ;խորհուրդ է տրվում ֆիլտրի փամփուշտներով խորհուրդներ:Խուսափեք խաչաձեւ աղտոտումից և աերոզոլային աղտոտումից:
2.Ռեակցիայի ծրագիր
| Ցիկլային քայլ | Ջերմաստիճանը | Ժամանակը | Ցիկլեր |
| Հակադարձ արտագրում | 50℃a | 6 րոպե | 1 |
| Նախնական դենատուրացիա | 95℃ | 5 րոպե | 1 |
| Ուժեղացման ռեակցիա | 95℃ | 15 վրկ | 40 |
| 60℃b | 30 վրկ | ||
| Հալման կորի փուլ | Գործիքների լռելյայն | 1 | |
Նշումներ:
1) ա.Հակադարձ արտագրման ջերմաստիճանը կարող է ընտրվել 50-55°C-ի սահմաններում՝ ըստ փորձարարական կարիքների:ԴՆԹ-ի նմուշների համար հակադարձ արտագրման գործընթացը կարող է բաց թողնել:
2) բ.Հատուկ դեպքերում հալման/երկարացման ջերմաստիճանը կարող է կարգավորվել ըստ այբբենարանի Tm արժեքի, խորհուրդ է տրվում 60°C:
Նշումներ
1. Այս ապրանքը նախատեսված է միայն հետազոտական օգտագործման համար:
2. Խնդրում ենք գործել լաբորատոր բաճկոններով և միանգամյա օգտագործման ձեռնոցներով՝ ձեր անվտանգության համար:
