Multiplex qPCR Probe Premix
Կատուի համարը՝ HCB5051A
TaqMan մուլտիպլեքս qPCR Master Mix (ներկի վրա հիմնված) նախնական լուծում է 2 × իրական ժամանակում քանակական PCR ուժեղացման համար, որը բնութագրվում է բարձր զգայունությամբ և յուրահատկությամբ, որն ունի կապույտ գույն և ունի նմուշի ավելացման էֆեկտ:Այս արտադրանքը 2× Mix նախապես խառնված ռեագենտ է, որը հնարավորություն է տալիս մինչև չորս լյումինեսցենտ քանակական PCR ռեակցիաներ մեկ ռեակցիայի հորատանցքում:Այս արտադրանքը պարունակում է գենետիկորեն ձևափոխված հակամարմինների մեթոդ Taq ֆերմենտի տաք մեկնարկի համար, ինչը զգալիորեն բարելավում է ուժեղացման զգայունությունն ու առանձնահատկությունը:Միևնույն ժամանակ, այս արտադրանքը խորապես օպտիմիզացրել է բազմակի ռեակցիայի բուֆերը, որը կարող է բարելավել ռեակցիայի ուժեղացման արդյունավետությունը և նպաստել ցածր խտության կաղապարների արդյունավետ ուժեղացմանը:Այս արտադրանքը կարող է օգտագործվել գենոտիպավորման և մուլտիպլեքսային քանակական վերլուծության համար:
Հստակեցում
| Թեժ մեկնարկ | Ներկառուցված տաք մեկնարկ |
| Հայտնաբերման մեթոդ | Պրայմեր-զոնդի հայտնաբերում |
| PCR մեթոդ | qPCR |
| Պոլիմերազ | Taq ԴՆԹ պոլիմերազ |
| Նմուշի տեսակը | ԴՆԹ |
Պահպանման պայմանները
Ապրանքը առաքվում է չոր սառույցով և կարող է պահպանվել -25~-15℃ ջերմաստիճանում 2 տարի:
Հրահանգներ
1. ՌեակցիաՀամակարգ
| Բաղադրիչներ | Ծավալը (μL) | Վերջնական համակենտրոնացում |
| 2× TaqMan մուլտիպլեքս qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Նախաներկի խառնուրդ (10 մկմոլ/լ) a | × | 0,1 - 0,5 մկմոլ/լ |
| Զոնդի խառնուրդ (10 մկմոլ/լ)b | × | 50 - 250 նմոլ/լ |
| Rox ռեֆերենս ներկ | 0.5 | 1× |
| Կաղապար ԴՆԹ/cDNA | 1-10 | - |
| դդՀ2O | մինչև 25 | - |
Նշումներ:Օգտագործելուց առաջ մանրակրկիտ խառնել՝ ուժեղ ցնցումից ավելորդ փուչիկներից խուսափելու համար:
ա.Primer-ի կոնցենտրացիան. Primer Mix-ը պարունակում է մի քանի զույգ պրայմերներ, սովորաբար յուրաքանչյուր այբբենարան 0,2 մկմոլ/լ վերջնական կոնցենտրացիայով և կարող է նաև ճշգրտվել 0,1-ից 0,5 մկմոլ/լ, ըստ անհրաժեշտության:
բ.Զոնդի կոնցենտրացիան. Probe Mix-ը պարունակում է բազմաթիվ զոնդեր տարբեր ֆլուորեսցենտային ազդանշաններով, և յուրաքանչյուր զոնդի կոնցենտրացիան կարող է ճշգրտվել 50-ից 250 նմոլ/լ՝ ըստ կոնկրետ իրավիճակի:
1.Rox ներկի հղում. Այն օգտագործվում է իրական ժամանակում PCR ուժեղացման գործիքի վրա, ինչպիսին է Applied Biosystems-ը հորերի միջև առաջացած ֆլյուորեսցենտային ազդանշանի սխալը շտկելու համար:այս ապրանքը չի պարունակում Rox ներկի հղում:Անհրաժեշտության դեպքում խորհուրդ է տրվում Cas#10200:
2.Կաղապարի նոսրացում. qPCR-ն շատ զգայուն է, և խորհուրդ է տրվում օգտագործել կաղապարը նոսրացնել:Եթե ձևանմուշը cDNA պահեստային լուծույթ է, ապա կաղապարի ծավալը չպետք է գերազանցի ընդհանուր ծավալի 1/10-ը:
3.Ռեակցիայի համակարգ. 25 μL, 30 μL կամ 50 μL խորհուրդ է տրվում ապահովել թիրախ գենի ուժեղացման արդյունավետությունն ու կրկնելիությունը:
4.Համակարգի պատրաստում. Խնդրում ենք պատրաստել գերմաքուր նստարանին և օգտագործեք ծայրերը և ռեակցիոն խողովակները՝ առանց նուկլեազի մնացորդի;խորհուրդ է տրվում օգտագործել ֆիլտրային փամփուշտներով խորհուրդները:Խուսափեք խաչաձեւ աղտոտումից և աերոզոլային աղտոտումից:
2.Ռեակցիայի ծրագիր
| Ցիկլային քայլ | Ջերմաստիճանը. | Ժամանակը | Ցիկլեր |
| Նախնական-դենատուրացիա | 95 ℃ | 5 րոպե | 1 |
| Դենատուրացիա | 95 ℃ | 15 վրկ | 45 |
| Կառուցում/ընդլայնում | 60 ℃ | 30 վրկ |
Նշումներ:
1.Կառուցում/երկարացում. Ջերմաստիճանը և ժամանակը կարող են համապատասխան կերպով կարգավորվել՝ ըստ նախագծված այբբենարանի Tm արժեքի:
2.Լյումինեսցենտային ազդանշանի ստացում. QPCR հայտնաբերման տարբեր գործիքների համար պահանջվող լյումինեսցենտային ազդանշանի ստացման ժամանակը տարբեր է, խնդրում ենք սահմանել ըստ նվազագույն ժամկետի:Մի քանի սովորական գործիքների ժամանակը սահմանվում է հետևյալ կերպ.
20 վրկ. Կիրառական կենսահամակարգեր 7700, 7900HT, 7500 արագ
31 վրկ. Applied Biosystems 7300
32 վրկ. Applied Biosystems 7500
Նշումներ
Խնդրում ենք կրել անհրաժեշտ PPE, նման լաբորատոր վերարկու և ձեռնոցներ՝ ձեր առողջությունն ու անվտանգությունն ապահովելու համար:
