2×HiF Taq plus Master Mix
Կատուի համարը՝ HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (ներկանյութով) պատրաստի օգտագործման 2×նախախառնված լուծույթ է, որը պարունակում է Plus HIF ԴՆԹ պոլիմերազ, dNTPs և օպտիմիզացված բուֆեր:Երկու մոնոկլոնալ հակամարմիններ սենյակային ջերմաստիճանում, որոնք արգելակում են պոլիմերազային ակտիվությունը և 3'→5'էկզոնուկլեազային ակտիվությունը, ավելացվում են հիմնական խառնուրդին հեշտ և բարձր սպեցիֆիկ Hot Start PCR-ի համար:Ընդլայնման գործոնը ավելացվում է հիմնական խառնուրդին, որպեսզի ֆերմենտին տրվի երկար հատվածի ուժեղացման հզորություն, ուժեղացման երկարությունը կարող է լինել մինչև 13 կբ, ֆերմենտն ունի 5'→3' ԴՆԹ պոլիմերազային ակտիվություն և 3'→5': էկզոնուկլեազային ակտիվությունը, դրա հավատարմությունը 83 անգամ գերազանցում է Taq ԴՆԹ պոլիմերազին, որը 9 անգամ գերազանցում է սովորական ԴՆԹ պոլիմերազին:Հարմար է բարդ կաղապարների ուժեղացման համար, ուժեղացման արտադրանքը բութ ծայր է:
2×HIF Taq plus Master Mix (With Dye) ունի արագ և հեշտ, բարձր զգայունության, ուժեղ յուրահատկության, լավ կայունության և այլնի առավելությունները, ռեակցիայի համակարգը միայն պետք է ավելացնի պրայմերներ և կաղապարներ և կարող է ուժեղացվել երկու-ով: քայլ արձանագրություն՝ պարզեցնելով փորձարարական քայլերը և խնայելով ժամանակը:Այս արտադրանքը պարունակում է էլեկտրոֆորեզի ցուցիչի ներկեր, և PCR արտադրանքը կարող է օգտագործվել ուղղակիորեն էլեկտրոֆորեզի համար:Բացի այդ, արտադրանքը պարունակում է նաև հատուկ պաշտպանիչ նյութ, որպեսզի հիմնական խառնուրդը կարողանա պահպանել կայուն ակտիվությունը կրկնակի սառեցման-հալեցումից հետո:
Պահպանման պայմանները
Ապրանքները պետք է պահվեն -25~-15℃ ջերմաստիճանում 1 տարի:
Տեխնիկական պայմաններ
| Ապրանքի հստակեցում | Master Mix |
| Համակենտրոնացում | 2× |
| Թեժ մեկնարկ | Ներկառուցված Hot Start |
| Գերազանցություն | Բութ |
| Ռեակցիայի արագությունը | Արագ |
| Չափը (վերջնական արտադրանք) | Մինչև 13 կբ |
| Փոխադրման պայմանները | Չոր սառույց |
| Ապրանքի տեսակը | Բարձր հավատարմության PCR պրեմիքսներ |
Հրահանգներ
1.PCR ռեակցիայի համակարգ
| Բաղադրիչներ | Ծավալը (μL) |
| ԴՆԹ ձևանմուշ | Հարմար |
| Առաջնային այբբենարան (10 մկմոլ/լ) | 2.5 |
| Reverse Primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq plus Master Mix | 25 |
| դդՀ2O | մինչև 50 |
2.Առաջարկվում է օգտագործել տարբեր ձևանմուշներ
| Կաղապարի տեսակը | Ուժեղացնել բեկորները 1կբ-ից մինչև 10կբ |
| Գենոմային ԴՆԹ | 50 նգ-200 նգ |
| Պլազմիդային կամ վիրուսային ԴՆԹ | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2,5 մկլ (Մի գերազանցեք PCR ռեակցիայի վերջնական ծավալի 10%-ը) |
3.Ուժեղացման արձանագրություն
1) Երկքայլ արձանագրություն (բարդության ձևանմուշ)
| Ցիկլային քայլ | Ջերմաստիճանը | Ժամանակը | Ցիկլեր |
| Նախնական դենատուրացիա | 98℃ | 3 րոպե | 1 |
| Դենատուրացիա | 98℃ | 10 վրկ | 30-35 թթ |
| Ընդլայնումը | 68℃ | 30 վրկ/կբ | |
| Վերջնական երկարաձգում | 72℃ | 5 րոպե | 1 |
2) Եռաքայլ արձանագրություն (սովորական արձանագրություն)
| Ցիկլային քայլ | Ջերմաստիճանը | Ժամանակը | Ցիկլեր |
| Նախնական դենատուրացիա | 98℃ | 3 րոպե | 1 |
| Դենատուրացիա | 98℃ | 10 վրկ | 30-35 թթ |
| Հալեցում | 60℃ | 20 վրկ | |
| Ընդլայնումը | 72℃ | 30 վրկ/կբ | |
| Վերջնական երկարաձգում | 72℃ | 5 րոպե | 1 |
3) կռելու գրադիենտ արձանագրություն (բարդության ձևանմուշ)
| Ցիկլային քայլ | Ջերմաստիճանը | Ժամանակը | Ցիկլեր |
| Նախնական դենատուրացիա | 98℃ | 3 րոպե | 1 |
| Դենատուրացիա | 98℃ | 10 վրկ | 15 (1℃ կրճատում մեկ ցիկլի համար) |
| Գրադիենտ կռում | 70-55℃ | 20 վրկ | |
| Ընդլայնումը | 72℃ | 30 վրկ/կբ | |
| Դենատուրացիա | 98℃ | 10 վրկ |
20 |
| Հալեցում | 55℃ | 20 վրկ | |
| Ընդլայնումը | 72℃ | 30 վրկ/կբ | |
| Վերջնական երկարաձգում | 72℃ | 5 րոպե | 1 |
Առանձնահատկություններ տարբեր ուժեղացման արձանագրության ներքո
| Արձանագրությունl | Երկու քայլ | Երեք քայլ | Գրադիենտ կռում |
| Տեսակ. | արագ | միջին | դանդաղ |
| Կոնկրետություն | բարձր | միջին | բարձր |
| PCR եկամտաբերությունը | միջին | բարձր | միջին |
| Հայտնաբերման արագություն | բարձր | միջին | բարձր |
Նշումներ
Խնդրում ենք կրել անհրաժեշտ PPE, նման լաբորատոր վերարկու և ձեռնոցներ՝ ձեր առողջությունն ու անվտանգությունն ապահովելու համար:
