RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Այս արտադրանքը պարունակում է ռեակցիայի բուֆեր, RT-Enzymes Mix (Bst ԴՆԹ պոլիմերազ և ջերմակայուն հակադարձ տրանսկրիպտազ), լիոֆիլացված Պաշտպանիչներ և քրոմոգեն ներկանյութեր:Օգտագործման համար պարզապես օգտագործեք Buffer, ռեակցիայի ֆերմենտը և այբբենարանը խառնվում են և ավելացվում կաղապարի մեջ;ավելացնելով լիոֆիլացված պաշտպանիչ կարող է լինել ուղիղ:Այն միացված էր լիոֆիլիզատորին և լիոֆիլացված էր, և օգտագործվելիս ավելացվում էին միայն այբբենարաններն ու կաղապարները:Այս հավաքածուն ապահովում է ուժեղացման արագ, հստակ տեսողական հայտնաբերում, որի բացասական արձագանքը նշվում է կարմիրով, իսկ դրական ռեակցիան նշվում է դեղինի փոփոխությամբ:
Բաղադրիչ
| Բաղադրիչ | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Օղակի միջնորդավորված ուժեղացման բուֆեր (ներկանյութով) | 0,96 մլ | 4,80 մլ×2 | 9.60 մլ×10 |
| RT-Enzymes Mix | 270 մլ | 2,70 մլ | 2.70 մլ×10 |
| Լյոֆիլացված պաշտպանիչ | 0.96 մլ × 2 | 9.60 մլ×2 | 9,60 մլ×20 |
Դիմումներ
ԴՆԹ-ի կամ ՌՆԹ-ի իզոթերմային ուժեղացման համար:
Պահպանման պայմանները
Տեղափոխվում է չոր սառույցով, պահվում է -25~ -15℃:Խուսափեք հաճախակի սառցակալումից, արտադրանքը վավերական է 12 ամիս:
Արձանագրություն
1.Հալեցրեք ռեակցիայի բուֆերը, որը պետք է օգտագործվի սենյակային ջերմաստիճանում:Մի քանի անգամ պտտեցրեք կամ շրջեք խողովակները, որպեսզի մանրակրկիտ խառնվեն, ապա ցենտրիֆուգեք՝ հեղուկը խողովակի հատակը հավաքելու համար:
2.Ռեակցիոն համակարգի պատրաստում.Այս ռեագենտը կարող է պատրաստվել երկու ռեակցիոն համակարգերում՝ հեղուկ ռեակցիայի խառնուրդ և լիոֆիլացված համակարգի խառնուրդ:
1) Պատրաստել հեղուկ ռեակցիայի խառնուրդ
| Բաղադրիչ | Ծավալը |
| Օղակի միջնորդավորված ուժեղացման բուֆեր (ներկանյութով) | 10 մլ |
| RT-Enzymes Mix | 2,8 մլ |
| 10 × Primer Mixa | 5 մլ |
| ԴՆԹ/ՌՆԹ կաղապարներ b | × μL |
| Միջուկազերծ ջուր | Մինչև 50 մլ |
2) լիոֆիլացման համակարգի խառնուրդ
① Պատրաստեք լիոֆիլացված խառնուրդ
| Բաղադրիչ | Ծավալը |
| Օղակի միջնորդավորված ուժեղացման բուֆեր (ներկանյութով) | 10 մլ |
| Լյոֆիլացված պաշտպանիչ | 20 մլ |
| RT-Enzymes Mix | 2,8 մլ |
| Միջուկազերծ ջուր | Մինչև 50 մլ |
② Լիոֆիլացում. Պատրաստված խառնուրդը լիոֆիլացվել է 50 μL համակարգում
③ Պատրաստեք ռեակցիայի խառնուրդը
| Բաղադրիչ | Ծավալը |
| Լյոֆիլացված խառնուրդ | 1 հատ |
| 10 × Primer Mixa | 5 մլ |
| ԴՆԹ/ՌՆԹ կաղապարներ b | × μL |
| Միջուկազերծ ջուր | Մինչև 50 մլ |
Նշումներ:
1) ա.10×Primer Mix՝ 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) բ.DEPC-ը (ջրում լուծվող) խորհուրդ է տրվում նուկլեինաթթվի տամպլի համար:
1.Ինկուբացնել 65°C-ում 30-45 րոպե, որը կարող է երկարաձգվել ըստ գույնի փոփոխության Ռեակցիայի ժամանակի:
2.Անզեն աչքով դեղինը դրական էր, իսկ կարմիրը՝ բացասական։
Նշումներ
1.Աղը կարող է հայտնվել բուֆերային խողովակի հատակում, կարճ պտտել կամ մի քանի անգամ շրջել խողովակները՝ սենյակային ջերմաստիճանում մանրակրկիտ խառնելու համար:
2.Ռեակցիայի ջերմաստիճանը կարող է օպտիմալացվել 62 ℃-ից մինչև 68 ℃՝ ըստ պրայմերների վիճակի:
3.Փաթեթավորված ռեակտիվները չպետք է երկար ժամանակ մնան օդի հետ:
4.Կարմիր և դեղին գունաթափման ռեակցիան կախված է ռեակցիայի համակարգի pH-ի փոփոխությունից, խնդրում ենք չօգտագործել Տրիս նուկլեինաթթու պարունակող պահեստային լուծույթ, խորհուրդ է տրվում օգտագործել ddH:2O պահված նուկլեինաթթու;
5.Փորձը պետք է ստանդարտացված լինի, ներառյալ ռեակցիայի համակարգի պատրաստումը, լիոֆիլացումը և նմուշների մշակումը և նմուշների ավելացման գործընթացը.
6.Աղտոտումից խուսափելու համար առաջարկվում է ռեակցիայի համակարգը պատրաստել գերմաքուր նստարանում, այլ ձևանմուշներ ավելացնել սենյակի ծխախոտի վրա՝ կեղծ դրական միջամտությունից խուսափելու համար:
