Պերօքսիդազ (ծովաբողկի աղբյուր) հոմանիշ.HRP
Նկարագրություն
Ծովաբողկի պերօքսիդազը (HRP) մեկուսացված է ծովաբողկի (Amoracia rusticana) արմատներից և պատկանում է պերօքսիդազների ֆերոպրոտոպորֆիրինային խմբին։HRP-ն հեշտությամբ միանում է ջրածնի պերօքսիդին (H2O2):Ստացված [HRP-H2O2] համալիրը կարող է օքսիդացնել ջրածնի դոնորների լայն տեսականի.
Դոնոր + H2O2 → Օքսիդացված դոնոր + 2 H2O
HRP-ն կօքսիդացնի տարբեր ենթաշերտեր (տես Աղյուսակ 1).
• քրոմոգեն
• Քիմիալյումինեսցենտ (օրինակ՝ լյումինոլ կամ իզոլյումինոլ)
• Ֆտորոգեն (օրինակ՝ տիրամին, հոմովանիլիկ թթու կամ 4-հիդրօքսիֆենիլքացախաթթու)
HRP-ն մեկ շղթայով պոլիպեպտիդ է, որը պարունակում է չորս դիսուլֆիդային կամուրջներ:HRP-ն գլիկոպրոտեին է, որը պարունակում է 18% ածխաջրեր:Ածխաջրերի կազմը բաղկացած է գալակտոզից, արաբինոզից, քսիլոզից, ֆուկոզից, մանոզից, մանոզամինից և գալակտոզամինից՝ կախված հատուկ իզոզիմից:
HRP-ն իմունոգոլոբուլինների համար լայնորեն օգտագործվող պիտակ է իմունաքիմիայի բազմաթիվ տարբեր կիրառություններում, ներառյալ իմունոբլոտինգը, իմունոհիստոքիմիան և ELISA-ն:HRP-ն կարող է զուգակցվել հակամարմինների հետ մի քանի տարբեր մեթոդներով, ներառյալ գլյուտարալդեհիդը, պարոդատային օքսիդացումը, դիսուլֆիդային կապերի միջոցով, ինչպես նաև ամինո և թիոլ ուղղորդված խաչաձև կապող սարքերի միջոցով:HRP-ն հակամարմինների համար ամենացանկալի պիտակն է, քանի որ այն ամենափոքրն է և ամենակայունը երեք ամենահայտնի ֆերմենտային պիտակներից (պերօքսիդազ, β-գալակտոզիդազ, ալկալային ֆոսֆատազ), և դրա գլիկոզիլացումը հանգեցնում է ոչ սպեցիֆիկ կապի ցածրացման:Հրապարակվել է գլյուտարալդեհիդի և պարոդատի կոնյուգացիայի մեթոդների ակնարկ:
Պերօքսիդազը նաև օգտագործվում է լուծույթում գլյուկոզայի 4-ի և պերօքսիդների որոշման համար:Մի քանի հրապարակումներ, 6-24 թեզեր, 25-29 և դիսերտացիաներ 30-46 վկայակոչել են P8375-ի օգտագործումը իրենց հետազոտական արձանագրություններում:
Քիմիական կառուցվածք
Հստակեցում
Փորձարկման առարկաներ | Տեխնիկական պայմաններ |
Նկարագրություն | Կարմրադարչնագույն ամորֆ փոշի՝ լիոֆիլացված |
Գործունեություն | ≥100 U/mg |
Մաքրություն (SDS-PAGE) | ≥90% |
Լուծելիություն (10 մգ փոշի/մլ) | Պարզ |
Պարունակող ֆերմենտներ | |
NADH/NADPH օքսիդազ | ≤0,1% |
Կատալազ | ≤0,005% |
ATPase | ≤0.03% |
Փոխադրում և պահեստավորում
Տրանսպորտ:Առաքվում է 2-8°C ջերմաստիճանում
Պահպանում:Պահել -20°C (երկարաժամկետ), 2-8°C (կարճաժամկետ)
Առաջարկվում է կրկնակի փորձարկումԿյանք.2 տարի