Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Նկարագրություն
Կատուի համարը՝ HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix-ը մուլտիպլեքսային քանակական PCR հավաքածու է, որը հիմնված է ՌՆԹ-ի վրա որպես ձևանմուշ:Փորձի ընթացքում հակադարձ տրանսկրիպցիան և քանակական ՊՇՌ-ն կատարվում են նույն ռեակցիայի խողովակում՝ պարզեցնելով փորձարարական գործողությունը և նվազեցնելով աղտոտման վտանգը:Բուֆերային և ֆերմենտային խառնուրդի յուրահատուկ դիզայնը կարող է օգտագործվել մեկ քայլ լիոֆիլացված համակարգում:Հավաքածուն օգտագործում է ջերմակայուն հակադարձ տրանսկրիպտազա առաջին շղթայի cDNA-ի արդյունավետ սինթեզի համար՝ օգտագործելով hotstart Taq DNA պոլիմերազը՝ քանակական ուժեղացման համար:Այն պարունակում է օպտիմիզացված ռեակցիայի բուֆեր, ֆերմենտների խառնուրդ և այլն, և ավելացվել են գործոններ, որոնք արդյունավետորեն արգելակում են ոչ սպեցիֆիկ PCR ուժեղացումը և բարձրացնում բազմակի qPCR ռեակցիաների ուժեղացման արդյունավետությունը՝ հնարավորություն տալով բազմակի ֆլուորեսցենտային քանակական ուժեղացում՝ միաժամանակ ապահովելով պրայմերների ուժեղացման արդյունավետությունը:
Բաղադրիչներ
Անուն |
1. Լյո-Բուֆեր |
2. Lyo-Enzyme Mix |
3. Լյո պաշտպանիչ |
Տրանսպորտային վիճակիոն
A: Lyo-բուֆեր և պաշտպանիչ: -25~-15℃, պահպանման ժամկետը 1 տարի է:
B. Lyo-enzyme խառնուրդ, 2-8 ℃, պահպանման ժամկետը 6 ամիս է:
Գործողության հրահանգ
1. Ռեակցիոն համակարգ (Վերցրեք 25 μL որպես օրինակ)
Բաղադրիչներ | Ծավալը (μL) | Վերջնական համակենտրոնացում |
Լյո-Բուֆեր | 6 | 1* |
Lyo-Enzyme Mix | 1 | - |
Լյո-Պրոտեկտանտ | 8 | - |
Primer Mix (10 μM) | 1 | 0,1- 1 մՄ |
Զոնդի խառնուրդ (10 մկՄ) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
ՌՆԹ ձևանմուշ | 5 | - |
DEPC H2O | Մինչև 25 | - |
2. Հեծանվավազքի օպտիմիզացված արձանագրություն
1) Հեծանվավազքի ստանդարտ արձանագրություն
Ռեակցիայի փուլ | Ջերմաստիճանը | Ժամանակը | Ցիկլ | |
1 | Հակադարձ արտագրում | 50°Ca | 10 րոպե | 1 |
2 | Նախնական դենատուրացիա | 95°C | 5 րոպե | 1 |
3 | Ուժեղացման ռեակցիա | 95°C | 15 վրկ | 45 ցիկլեր |
60°Cb | 30 վրկc |
2) Արագ հեծանվավազքի արձանագրություն
| Ռեակցիայի փուլ | Ջերմաստիճանը | Ժամանակը | Ցիկլ |
1 | Հակադարձ արտագրում | 50°Ca | 2 րոպե | 1 |
2 | Նախնական դենատուրացիա | 95°C | 2 վրկ | 1 |
3 | Ուժեղացման ռեակցիա | 95°C | 1 վրկ |
45 ցիկլեր |
60°Cb | 13 վրկc |
Նշում:
a) Հակադարձ արտագրումՋերմաստիճանը կարող է ընտրել 42°C կամ 50°C 10-15 րոպեի ընթացքում:
b) Ուժեղացման ռեակցիաՋերմաստիճանը ճշգրտվում է նախագծված այբբենարանների Tm արժեքին համապատասխան:
գ)Լյումինեսցենտ ազդանշան ձեռքբերումԽնդրում ենք սահմանել փորձարարական ընթացակարգը ըստ պահանջներիգործիքի ձեռնարկ.
Տեխնիկական տեղեկատվություն/Տեխնիկական պայմաններ
Թեժ մեկնարկ | Ներկառուցված տաք մեկնարկ |
Հայտնաբերման մեթոդ | Պրայմեր-զոնդի հայտնաբերում |
PCR մեթոդ | Մեկ քայլ RT-qPCR |
Նմուշի տեսակը | ՌՆԹ |
Նշումներ
1. Այս ապրանքը նախատեսված է միայն հետազոտական օգտագործման համար:
2. Խնդրում ենք կրել անհրաժեշտ PPE, ինչպիսիք են լաբորատոր վերարկու և ձեռնոցներ՝ ձեր առողջությունն ու անվտանգությունն ապահովելու համար: