Դեզօքսիռիբոնուկլեազ I (Dnase I)
Նկարագրություն
DNase I-ը (Դեզօքսիռիբոնուկլեազ I) էնդոդեօքսիռիբոնուկլեազ է, որը կարող է մարսել մեկ կամ երկշղթա ԴՆԹ:Այն ճանաչում և ճեղքում է ֆոսֆոդիստերային կապերը՝ արտադրելու մոնոդեօքսինուկլեոտիդներ կամ միակողմանի կամ երկշղթա օլիգոդեօքսինուկլեոտիդներ՝ ֆոսֆատային խմբերով 5'-տերմինալում և հիդրոքսիլ՝ 3'-տերմինալում:DNase I-ի ակտիվությունը կախված է Ca 2+-ից և կարող է ակտիվացվել երկվալենտ մետաղական իոնների միջոցով, ինչպիսիք են Mn 2+ և Zn 2+:5 mM Ca 2+-ը պաշտպանում է ֆերմենտը հիդրոլիզից:Mg 2+-ի առկայության դեպքում ֆերմենտը կարող է պատահականորեն ճանաչել և կտրել ԴՆԹ-ի ցանկացած շղթայի ցանկացած տեղ:Mn 2+-ի առկայության դեպքում ԴՆԹ-ի կրկնակի շղթաները կարող են միաժամանակ ճանաչվել և ճեղքվել գրեթե նույն տեղում՝ ձևավորելով հարթ ծայրի ԴՆԹ-ի բեկորներ կամ ԴՆԹ-ի վերջի կպչուն բեկորներ՝ 1-2 նուկլեոտիդներով դուրս ցցված:
Քիմիական կառուցվածք
Միավորի սահմանում
Մեկ միավորը սահմանվում է որպես ֆերմենտի քանակություն, որն ամբողջությամբ կքայքայի 1 մկգ pBR322 ԴՆԹ-ն 10 րոպեում 37°C ջերմաստիճանում:
Հստակեցում
Փորձարկման առարկաներ | Տեխնիկական պայմաններ |
Մաքրություն (SDS-PAGE) | ≥ 95% |
Rnase գործունեությունը | Ոչ մի դեգրադացիա |
gDNA-ի աղտոտում | ≤ 1 պատճեն/մլ |
Փոխադրում և պահեստավորում
Տրանսպորտ.Առաքվում է 0 °C-ից ցածր
Պահպանում:Պահել -25~-15°C ջերմաստիճանում
Առաջարկվող կրկնակի փորձարկում Life:2 տարի