BsaI սահմանափակման էնդոնուկլեազ
Նկարագրություն
BsaI սահմանափակող ֆերմենտը II տիպի սահմանափակող էնդոնուկլեազ է, որը ստացվում է E.coli-ով արտահայտված BspQI գենով կոդավորված ռեկոմբինանտ սպիտակուցից:Սահմանափակող էնդոնուկլեազները լայնորեն կիրառվում են գեների քարտեզագրման, կլոնավորման և այլ ոլորտներում։Այս ֆերմենտը արագորեն կտրում է ԴՆԹ-ն՝ արդյունավետ գեների գծայնացման համար Bsa I-ը, IIs սահմանափակող էնդոնուկլեազի սահմանափակման էնդոնուկլեազը, ստացվում է ռեկոմբինանտ E. coli շտամից, որը կրում է կլոնավորված և փոփոխված BsaI գենը Bacillus stearothermophilus-ից:որոնք ունեն նույն առանձնահատկությունը, ինչ բնիկ ֆերմենտները և նվազեցված աստղային ակտիվություն:Դրա ճանաչման հաջորդականությունը և ճեղքման վայրերը հետևյալն են.
5'·······GGTCTC(N)······· 3'
3'·······CCAGAG(NNNNN)········5'
Քիմիական կառուցվածք
Ապրանքի Նկարագրություն
• Սահմանափակման էնդոնուկլեազն ունի բարձր ֆերմենտային ակտիվություն և արագ ավարտում է մարսողական ռեակցիան:
• Ցածր ոչ սպեցիֆիկ էնդոնուկլեազային ակտիվություն՝ ճշգրիտ «scalpel» կտրում ապահովելու համար:
• Ոչ BSA համակարգ, որը նվազեցնում է ջերմային աղբյուրների աղտոտումը:
Հստակեցում
Փորձարկման առարկաներ | Տեխնիկական պայմաններ |
Ֆերմենտային ակտիվություն | 20 U/µL |
Մաքրություն (SDS-PAGE) | ≥95% |
Ռնասե | Ոչ մեկը չի հայտնաբերվել |
Ոչ սպեցիֆիկ DNase գործունեություն | Չհայտնաբերված |
Աստղային գործունեություն | Չհայտնաբերված |
Կապակցում և կրճատում | Մարսումից հետո ԴՆԹ-ի բեկորները կարող են կապակցվել:Եվ այս կապակցված բեկորները կարելի է վերակտրել Բսալով։ |
Էնդոտոքսիններ (LAL-թեստ) | ≤10 ԵՄ/մգ |
E.Coli ԴՆԹ | ≤1 Պատճեն/2U |
Որակի հսկողություն
Մաքրություն ≥ 95%, Առանց DNase, RNase ակտիվություն, հյուրընկալող ԴՆԹ մնացորդ ≤ 100 pg/mg, հյուրընկալող սպիտակուցի մնացորդ ≤ -50ppm, էնդոտոքսին մնացորդ ≤ 10EU/mg, Պրոթեզերոնի ակտիվություն չկա, ստերիլ, առանց միկոպլազմայի
Դիմում
Մարսել պլազմիդը՝ Poly-ի վերջում գծային ԴՆԹ-ի բեկոր պատրաստելու համար (A/T/C/G);
Գծայինացնել պլազմիդի ձևանմուշը մինչև in vitro արտագրումը;
Սահմանափակում մարսողություն;
Միավորի սահմանում
Մեկ միավորը սահմանվում է որպես ֆերմենտի քանակություն, որն անհրաժեշտ է 1 ժամվա ընթացքում 37°C-ում 1 մկգ ներքին հսկողության ԴՆԹ-ի մարսման համար 50 մկլ ռեակցիայի ընդհանուր ծավալով:
Փոխադրում և պահեստավորում
Տրանսպորտ.Առաքվում է -15°C-ից ցածր
Պահպանում:Պահել -25~-15°C ջերմաստիճանում
Առաջարկվող կրկնակի փորձարկում Life:1 տարի